EBER
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EBER - Pesquisa CISH de RNA viral do EBV (EBER ISH)
Detecção de RNA codificado pelo vírus EBV (EBER) no diagnóstico de doenças e neoplasias associadas ao Epstein-Barr vírus (EBV).
Prazo:
5 dias úteis após recebimento da amostra
Material / Meio de coleta:
Tecido tumoral / Bloco de parafina
Técnica:
FISH ou CISH
Topografia:
Cabeça e pescoço, Partes moles, Sangue e medula óssea, Sistema linfático
Aplicação Clínica:
Diagnóstico
Indicações para o teste:
Diagnóstico:
- Mononucleose infecciosa;
- Carcinoma nasofaríngeo;
- Linfoma de Burkitt;
- Linfoma de células B em condições de imunodeficiência;
- Linfoma de Hodgkin clássico.
Procedimento e interpretação do teste:
O tecido fixado em formalina e embebido em parafina em uma lâmina de vidro é desparafinizado e depois tratado com pepsina para digerir as proteínas do tecido e permitir que as sondas atinjam o DNA alvo. O DNA é então desnaturado pelo calor e subsequentemente permitido hibridizar com o conjunto de sondas específicas. Após a hibridização, as lâminas são lavadas para remover qualquer excesso de sondas não ligadas e os núcleos são corados com a coloração DAPI (4',6'-diamino-2-fenil-indol).
A enumeração dos sinais de fusão e separação é realizada por exame microscópico dos núcleos das células, usando um microscópio de fluorescência e equipado com filtros de emissão e excitação apropriados.
Os resultados são obtidos após análise de um mínimo de 50 núcleos interfásicos (100 no total) com os resultados expressos como a porcentagem de núcleos anormais.
Relevância clínica:
O vírus Epstein-Barr (EBV) produz transcritos EBER abundantemente expressos e concentrados nos núcleos de células infectadas latentemente.
A Imunossupressão e infecção pelo HIV estão associadas a pior prognóstico.
Estadiamento crítico para prognóstico e tratamento precisos.
A doença em estágio inicial inclui grupos favoráveis e desfavoráveis.
Taxas de cura de 80 a 90% com terapia adaptada ao estágio, e 10 - 25% dos pacientes têm doença refratária primária ou recaída.
Resultados e considerações:
Este conjunto de sondas marca todas as células latentes infectadas com EBV, incluindo linhagens de células linfoblastóides positivas para EBV e imunoblastos de células B infectados com EBV em mononucleose infecciosa. Também reage com carcinomas nasofaríngeos indiferenciados associados ao EBV e com células de Reed-Sternberg em quase todos os casos de linfoma de Hodgkin associado ao EBV.
- Negativo: A presença de RNA do vírus Epstein-Barr não é detectada nas células analisadas.
- Positivo: A presença de RNA do vírus Epstein-Barr é detectada nas células analisadas.
Os resultados devem ser interpretados no contexto dos achados clínicos, história familiar e outros dados laboratoriais. A interpretação incorreta dos resultados pode ocorrer se as informações fornecidas forem imprecisas ou incompletas.
Referências:
- Yu F, Lu Y, Petersson F, et al: Presence of lytic Epstein-Barr virus infection in nasopharyngeal carcinoma. Head Neck. 2018 Jul;40(7):1515-1523. doi: 10.1002/hed.25131;
- Randhawa PS, Jaffe R, Demetris AJ, et al: The systemic distribution of Epstein-Barr virus genomes in fatal post-transplantation lymphoproliferative disorders. An in situ hybridization study. Am J Pathol. 1991; 138:1027-1033;
- Chang KL, Chen YY, Shibata D, Weiss LM: Description of an in situ hybridization methodology for detection of Epstein-Barr Virus RNA in paraffin-embedded tissues, with a survey of normal and neoplastic tissues. Diagn Mol Pathol. 1992; 1:246-255.