Indicações para o teste:

• Diagnóstico: Carcinoma mucoepidermóide.
• Diagnóstico diferencial: Carcinoma mucoepidermóide Warthin-like.
• Prognóstico: Favorável.

Procedimento e Interpretação do teste:

O tecido fixado em formalina e embebido em parafina em uma lâmina de vidro é desparafinizado e depois tratado com pepsina para digerir as proteínas do tecido e permitir que as sondas atinjam o DNA alvo. O DNA é então desnaturado pelo calor e subsequentemente permitido hibridizar com o conjunto de sondas específicas. Após a hibridização, as lâminas são lavadas para remover qualquer excesso de sondas não ligadas e os núcleos são corados com a coloração DAPI (4',6'-diamino-2-fenil-indol).

A enumeração dos sinais de fusão e separação é realizada por exame microscópico dos núcleos das células, usando um microscópio de fluorescência e equipado com filtros de emissão e excitação apropriados.

Os resultados são obtidos após análise de um mínimo de 50 núcleos interfásicos (100 no total) com os resultados expressos como a porcentagem de núcleos anormais.

Relevância Clínica:

A análise de translocação t(11;19) (q21;p13) (CRTC1-MAML2) é, juntamente com a translocação t(11;15)(q21;q26) (CRTC3-MAML2), uma característica típica do carcinoma mucoepidermóide (MEC) que é um dos tumores malignos mais frequentes das glândulas salivares. Além disso, o produto dessa fusão também foi encontrado nos tumores de Warthin e no hidradenoma de células claras da pele.

Nesta translocação ocorre uma quebra no íntron 1 do gene CRTC1 (também chamado de MECT1, TORC1 e WAMPT1) que está localizado no cromossomo 19 e no íntron 1 do gene MAML2 (Mastermind-like 2) que se encontra no cromossomo 11. Essa quebra resulta na formação de um gene de fusão que é composto pelo exon 1 do gene MECT1 e exon 2 a 5 do gene MAML2.

A proteína codificada pelo gene CRTC1 pertence à família de coativadores CREC (ligação ao elemento de resposta cAMP) altamente conservadores. CRTC1 aumenta a transcrição de CRE (elemento de resposta cAMP) através da interação com o domínio CREB bZIP (o zíper de leucina básica).

O produto do gene MAML2 é um coativador transcricional na via de sinalização Notch. A proteína MAML2 forma um complexo com o domínio intracelular da proteína Notch e com proteínas da família CLS de fatores de transcrição. Essa interação leva à ativação de genes Notch downstream, como HES1 e HES5.

A proteína de fusão CRTC1/MAML2 possui o domínio básico N - terminal do gene MAML2 substituído pelo domínio de ligação a CREB do gene CRTC1. As consequências moleculares dessa substituição não são totalmente compreendidas, mas os achados até agora sugerem que a proteína de fusão, independentemente dos sinais de entrada, ativa genes dependentes de CREB e também a via de sinalização Notch. A ativação de duas vias independentes, especialmente CREB, provavelmente contribui significativamente para um processo neoplásico real.

De acordo com alguns estudos recentes, pacientes com MEC carregando esta translocação ou translocação irmã CRTC3-MAML2 têm melhor prognóstico "livre de doença" e "sobrevida global” do que pacientes sem essas translocações.

Resultados e considerações:

• Negativo: Rearranjo na região do gene MAML2 não está presente.
• Positivo: Rearranjo na região do gene MAML2 está presente. O rearranjo do gene MAML2 é frequentemente identificado no carcinoma mucoepidermóide. A correlação clínica e patológica é recomendada.

Os resultados devem ser interpretados no contexto dos achados clínicos, história familiar e outros dados laboratoriais. A interpretação incorreta dos resultados pode ocorrer se as informações fornecidas forem imprecisas ou incompletas.

Referências:

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2. Okumura Y, Miyabe S, Nakayama T, Fujiyoshi Y, Hattori H, Shimozato K, Inagaki H. Impact of CRTC1/3-MAML2 fusions on histological classification and prognosis of mucoepidermoid carcinoma. Histopathology. 2011;59(1):90-7.
3. Nakayama T, Miyabe S, Okabe M, Sakuma H, Ijichi K, Hasegawa Y, Nagatsuka H,Shimozato K, Inagaki H. Clinicopathological significance of the CRTC3-MAML2 fusion transcript in mucoepidermoid carcinoma. Mod Pathol. 2009;22(12):1575-81.
4. Stenman G. Fusion oncogenes and tumor type specificity-insights from salivary gland tumors. Semin Cancer Biol. 2005;15(3):224-235. Review.
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