Indicações para o teste:

• Rearranjos em tumores ósseos e de partes moles.
• Fasciíte nodular.
• Cisto ósseo aneurismático.
• Miosite ossificante.
• Pseudotumor fibro-ósseo digital.
• Fibroma de bainha de tendão.

Procedimento e interpretação do teste:

O tecido fixado em formalina e embebido em parafina em uma lâmina de vidro é desparafinizado e depois tratado com pepsina para digerir as proteínas do tecido e permitir que as sondas atinjam o DNA alvo. O DNA é então desnaturado pelo calor e subsequentemente permitido hibridizar com o conjunto de sondas específicas. Após a hibridização, as lâminas são lavadas para remover qualquer excesso de sondas não ligadas e os núcleos são corados com a coloração DAPI (4',6'-diamino-2-fenil-indol).

A enumeração dos sinais de fusão e separação é realizada por exame microscópico dos núcleos das células, usando um microscópio de fluorescência e equipado com filtros de emissão e excitação apropriados.

Os resultados são obtidos após análise de um mínimo de 50 núcleos interfásicos (100 no total) com os resultados expressos como a porcentagem de núcleos anormais.

Relevância clínica:

O cisto ósseo aneurismático (COA) é um tumor ósseo multicístico e expansivo de linhagem de diferenciação incerta. Os rearranjos no gene Ubiquitina protease 6 (USP6) são detectáveis em aproximadamente 70% do COA primário e não são vistas em outras condições que podem simular histologicamente o COA, incluindo tumor ósseo de células gigantes, osteossarcoma, osteoblastoma, tumor marrom, querubismo e neoplasias vasculares.

A fasciíte nodular (FN) é uma lesão mesenquimal autolimitada de diferenciação miofibroblástica. O rápido crescimento do FN, a rica celularidade e a intensa atividade mitótica podem levar a um diagnóstico errôneo de sarcoma. Os rearranjos USP6 são detectáveis em 90% dos FN, mas não em outras condições que podem simular FN, incluindo dermatofibroma, histiocitoma fibroso celular, fibromatose e uma grande variedade de sarcomas.

Resultados e considerações:

• Negativo: Rearranjo do locus do gene USP6 em 17p13 não detectado. No entanto, esse resultado não exclui o diagnóstico de COA ou NF. O rearranjo varia em tumores individuais e entre células diferentes no mesmo tumor.
• Positivo: Rearranjo do locus do gene USP6 em 17p13U detectado. Um clone neoplásico é detectado quando a porcentagem de células com anormalidade excede o intervalo de referência normal para a sonda USP6 FISH (resultado positivo). Suporta o diagnóstico de cisto ósseo aneurismático ou fasceíte nodular.

Os resultados devem ser interpretados no contexto dos achados clínicos, história familiar e outros dados laboratoriais. A interpretação incorreta dos resultados pode ocorrer se as informações fornecidas forem imprecisas ou incompletas.

Referências:

1. Oliveira AM, Hsi B, Weremowicz S, et al: USP6 (Tre2) fusion oncogenes in aneurysmal bone cyst. Cancer Res 2004 Mar 15;64(6):1920-1923
2. Oliveira AM, Perez-Atayde AR, Inwards CY, et al: USP6 and CDH11 oncogenes identify the neoplastic cell in primary aneurysmal bone cysts and are absent in so-called secondary aneurysmal bone cysts. Am J Pathol 2004 Nov;165(5):1773-1780
3. Fletcher CDM, Unni KK, Mertens F: World Health Organization Classification of Tumors. Pathology and Genetics of Tumors of Soft Tissue and Bone. IARC Press, Lyon, France, 2005, pp 48-49
4. Erickson-Johnson MR, Chou MM, Evers BR, et al: Fusion of Non-Muscle Myosin MYH9 to USP6 Oncogene in Nodular Fasciitis, USCAP Abstract #39, 2011