Indicações para o teste:

• A translocação t(11;14) (q13;q32) é um marcador genético específico dos linfomas de células do manto (LCM).
• A translocação (11;14) também foi descrita no mieloma múltiplo, podendo ser usada como diagnóstico.
• Diagnóstico mais preciso e confiável principalmente nos casos em que apenas com base na morfologia e imunohistoquímica é difícil distinguir o LCM da leucemia linfocítica crônica, linfoma folicular ou linfoma de zona marginal. O teste tem uma influência crucial no tratamento do paciente.

Procedimento e interpretação do teste:

O tecido fixado em formalina e embebido em parafina em uma lâmina de vidro é desparafinizado e depois tratado com pepsina para digerir as proteínas do tecido e permitir que as sondas atinjam o DNA alvo. O DNA é então desnaturado pelo calor e subsequentemente permitido hibridizar com o conjunto de sondas específicas.

Após a hibridização, as lâminas são lavadas para remover qualquer excesso de sondas não ligadas e os núcleos são corados com a coloração DAPI (4',6'-diamino-2-fenil-indol).

A enumeração dos sinais de fusão e separação é realizada por exame microscópico dos núcleos das células, usando um microscópio de fluorescência e equipado com filtros de emissão e excitação apropriados.

Os resultados são obtidos após análise de um mínimo de 50 núcleos interfásicos (100 no total) com os resultados expressos como a porcentagem de núcleos anormais.

Relevância clínica:

Os linfomas de células do manto podem apresentar sobreposição morfológica e fenotípica com vários outros linfomas de células B, como leucemia linfocítica crônica de células B/linfoma linfocítico pequeno, linfoma linfoplasmocítico, linfoma de células B de zona marginal e linfoma folicular. É fundamental distinguir o LCM de outros linfomas de células B pequenas porque o linfoma de células do manto tem um prognóstico muito pior, com uma sobrevida média de apenas 3 a 5 anos.

Na translocação cromossômica t(11;14) (q13;q32) há a fusão da região de junção do gene para a cadeia pesada da imunoglobulina (IgH) no cromossomo 14 e região não codificante do gene ciclina D1 (CCND1), no cromossomo 11. Como consequência disso, ocorre a superexpressão da ciclina D1 e, portanto, a ruptura do equilíbrio da via central do ciclo celular.

Resultados e considerações:

• Negativo: A presença da t(11;14) fusão CCND1/IGH não é detectada nos núcleos analisados.
• Positivo: A presença da t(11;14) fusão CCND1/IGH é detectada em mais de 50% dos núcleos analisados.

Os resultados devem ser interpretados no contexto dos achados clínicos, história familiar e outros dados laboratoriais. A interpretação incorreta dos resultados pode ocorrer se as informações fornecidas forem imprecisas ou incompletas.

Referências:

1. Monteil M, Callanan M, Dascalescu C, et al: Molecular diagnosis of t(11;14) in mantle cell lymphoma using two-colour interphase fluorescence in situ hybridization. Br J Haematol. 1996 Jun;93(3):656-60. doi: 10.1046/j.1365-2141. 1996.d01-1675. x. PMID: 8652388.
2. Li JY, Gaillard F, Moreau A, Harousseau JL, et al: Detection of translocation t(11;14) (q13;q32) in mantle cell lymphoma by fluorescence in situ hybridization. Am J Pathol. 1999;154(5):1449-52.
3. Remstein ED, Kurtin PJ, Buño I, et al: Diagnostic utility of fluorescence in situ hybridization in mantle-cell lymphoma. Br J Haematol. 2000 Sep;110(4):856-62. doi: 10.1046/j.1365-2141.2000.02303. x. PMID: 11054068.
4. Caraway NP, Gu J, Lin P, et al: The utility of interphase fluorescence in situ hybridization for the detection of the translocation t(11;14) (q13;q32) in the diagnosis of mantle cell lymphoma on fine-needle aspiration specimens. Cancer. 2005 Apr 25;105(2):110-8. doi: 10.1002/cncr.20923. PMID: 15712276.
5. Alaggio R, Amador C, Anagnostopoulos I, et al: The 5th edition of the World Health Organization Classification of Haematolymphoid Tumours: Lymphoid Neoplasms. Leukemia. 2022 Jul;36(7):1720-1748. doi: 10.1038/s41375-022-01620-2. Epub 2022 Jun 22. PMID: 35732829; PMCID: PMC9214472.